Vector tái tổ hợp là gì
|
DNA được gọi là axit deoxyribonucleic, một loại polymer sinh học tạo nên vật liệu di truyền mà các tế bào chứa. DNA có thông tin di truyền mà sinh vật sử dụng để hoạt động và cho phép thông tin đó được truyền qua di truyền. DNA bao gồm một chuỗi các đơn vị đơn giản, được gọi là nucleotide (lần lượt được hình thành bởi một nhóm phốt phát, một cơ sở nitơ và đường). Khi một phân tử DNA được hình thành một cách nhân tạo từ sự kết hợp của các chuỗi DNA khác nhau đến từ hai sinh vật khác nhau, chúng ta nói về DNA tái tổ hợp . Có thể nói DNA tái tổ hợp là một phân tử DNA nhân tạo . Khi phân tử này được tạo ra trong ống nghiệm được đưa vào một sinh vật, một sự thay đổi di truyền diễn ra làm thay đổi các tính năng của nó. Sự xuất hiện và tạo ra DNA tái tổ hợp chúng ta phải nhấn mạnh rằng chúng đã xảy ra sau khi các nhà nghiên cứu thực hiện nhiều nghiên cứu về kiến thức về các enzyme cắt giới hạn, sao chép virus và plasmid, sao chép và sửa chữa DNA hoặc tổng hợp hóa học của những gì được gọi là trình tự nucleotide. Cụ thể, phải khẳng định rằng một yếu tố chính trong DNA nói trên đã được coi là không ai khác ngoài tập hợp các dự án được thực hiện bởi Hamilton O. Smith và Daniel Nathans trong những năm 1970. Cụ thể hơn, chúng tôi đề cập đến người đã thực hiện để khám phá các protein endonuclease, còn được biết đến với tên của các enzyme cắt giới hạn. Đối với tất cả những điều trên chúng ta có thể nói thêm rằng rất cần thiết phải biết rằng kỹ thuật tái tổ hợp DNA hiện đang được sử dụng ở mức độ lớn cả trong việc phát triển các sinh vật chuyển gen và trong quy định sản xuất tổng hợp protein, như trường hợp insulin. Bản thân quá trình sản xuất DNA nói trên có thể được xác định rằng nó bao gồm sáu giai đoạn được phân tách rõ ràng: -Sự chuẩn bị trình tự DNA để có thể thực hiện việc nhân bản có liên quan. - Việc chuẩn bị các vectơ nhân bản sẽ được sử dụng sau này. -Sự hình thành DNA tái tổ hợp. -Giới thiệu về điều đó trong tế bào chủ. -Quản lý của cây trồng. -Những gì sẽ được phát hiện và lựa chọn các dòng vô tính tái tổ hợp. Để phát triển DNA tái tổ hợp, các nhà sinh học làm việc trước tiên với một phân tử DNA của vi khuẩn, virus, thực vật hoặc sinh vật khác, thao túng nó trong phòng thí nghiệm. Sau đó, họ giới thiệu phân tử này vào một sinh vật khác. Thực hành này có thể hữu ích cho việc tạo ra vắc-xin hoặc để điều trị một số bệnh. Việc tạo ra DNA tái tổ hợp liên quan đến việc truyền chuỗi DNA có mối quan tâm đặc biệt, để đưa nó đến một sinh vật không có trình tự đó và do đó, cả hai sản phẩm của nó đều không có. Từ các quá trình này, có thể thu được các vi sinh vật bị thay đổi từ quan điểm di truyền để phát triển thuốc, thu được các loại thực phẩm biến đổi gen và tạo ra các loại cây chống lại sự tấn công của sâu bệnh.
DNA tái tổ hợp , các phân tử củaDNA từ hai loài khác nhau được đưa vào cơ thể vật chủ để tạo ra các tổ hợp di truyền mới có giá trị đối với khoa học , y học , nông nghiệp và công nghiệp. Vì trọng tâm của tất cả di truyền học là gen , nên mục tiêu cơ bản của các nhà di truyền học trong phòng thí nghiệm là phân lập, xác định đặc điểm và thao tác gen. Mặc dù việc phân lập một mẫu DNA từ một tập hợp các tế bào là tương đối dễ dàng, việc tìm kiếm một gen cụ thể trong mẫu DNA này có thể được so sánh với việc mò kim đáy bể. Hãy xem xét thực tế rằng mỗi tế bào của con người chứa khoảng 2 mét (6 feet) DNA. Do đó, một mẫu mô nhỏ sẽ chứa nhiều km DNA. Tuy nhiên, công nghệ DNA tái tổ hợp đã cho phép cô lập một gen hoặc bất kỳ đoạn DNA nào khác, cho phép các nhà nghiên cứu xác định trình tự nucleotide của nó , nghiên cứu các bản sao của nó, đột biến nó theo những cách rất cụ thể và lắp lại trình tự đã sửa đổi vào một cơ thể sống. Quá trình tách chiết DNA là cần thiết để tách các phân tử DNA từ tế bào hoặc mô. Một loạt các bước, bao gồm cả việc sử dụng enzyme protease để tách protein khỏi DNA, được yêu cầu để phân lập DNA tinh khiết phù hợp để sử dụng trong các quy trình sau này, chẳng hạn như nhân bản hoặc giải trình tự. Tiến sĩ Dominik Refardt / Đại học Basel, Thụy Sĩ.In biology a clone is a group of individual cells or organisms descended from one progenitor. This means that the members of a clone are genetically identical, because cell replication produces identical daughter cells each time. The use of the word clone has been extended to recombinant DNA technology, which has provided scientists with the ability to produce many copies of a single fragment of DNA, such as a gene, creating identical copies that constitute a DNA clone. In practice the procedure is carried out by inserting a DNA fragment into a small DNA molecule and then allowing this molecule to replicate inside a simple living cell such as a bacterium. The small replicating molecule is called a DNA vectơ (sóng mang). Các vectơ được sử dụng phổ biến nhất làplasmid (phân tử DNA tròn có nguồn gốc từ vi khuẩn ), vi rút và tế bào nấm men . Plasmid không phải là một phần của bộ gen tế bào chính, nhưng chúng có thể mang các gen cung cấp cho tế bào chủ các đặc tính hữu ích, chẳng hạn như khả năng kháng thuốc , khả năng giao phối và sản xuất độc tố . Chúng đủ nhỏ để có thể thao tác thuận tiện bằng thực nghiệm, và hơn nữa, chúng sẽ mang thêm DNA được nối vào chúng. Các bước liên quan đến kỹ thuật phân tử DNA tái tổ hợp. Encyclopædia Britannica, Inc.
Vẫn còn rất nhiều người lạ lẫn với thuật ngữ ADN tái tổ hợp, mục đích cũng như những phương pháp tạo nên chúng. Để giải đáp những thắc mắc này cho các bạn, sau đây chúng tôi sẽ gửi đến các bạn bài viết ADN tái tổ hợp là gì? Cùng với đó là mục đích và những phương pháp phổ biến để tạo nên ADN tái tổ hợp. ADN tái tổ hợp là những phân tử ADN được tạo thành từ 2 hoặc nhiều ADN của các loài sinh vật khác nhau. ADN tái tổ hợp được tạo nên nhờ sự tiến bộ của khoa học kỹ thuật và có nhiều ứng dụng trong cuộc sống. Hiện nay, với sự phát triển không ngừng về khoa học, phương pháp tạo nên ADN tổ hợp cũng dễ dàng hơn và cũng có nhiều người biết đến ADN tái tổ hợp là gì. Đọc Thêm: Bảng Giá xét nghiệm ADN hiện tại. Bên cạnh câu hỏi ADN tái tổ hợp là gì? Rất nhiều người còn không biết mục đích tạo nên những ADN này. Sau đây chúng tôi sẽ giải đáp những thắc mắc này cho các bạn. Với mục đích thực hiện quá trình sự tách dòng, ADN tái tổ hợp được các nhà khoa học tạo ra. Vậy quá trình tách dòng là gì? Tách dòng là quá trình các ADN tác lập và thu thập nhiều bản sao đồng nhất của một gen hoặc một đoạn ADN. Tách dòng có thể đi kèm hoặc không với sự biểu hiện của các Protein trong ADN. Quá trình này giúp tạo nên ADN tái tổ hợp và thiết lập nên ngân hàng bộ gen, cDNA,… Như các bạn đã biết, ADN tái tổ hợp là những ADN mới được tổng hợp, điều này tạo nên sự đa dạng cho ngân hàng bộ gen. Vậy những yêu cầu của ADN tái tổ hợp là gì?
Nhằm giúp giúp ngân hàng bộ gen thêm phong phú. Hiện nay, ADN tái tổ hợp được tạo nên ngày càng nhiều. Sau đây các bạn hãy cùng tìm hiểu những phương pháp thường được dùng để tạo nên ADN tái tổ hợp. Đây là phương pháp tạo nên ADN tái tổ hợp đơn giản và được sử dụng phổ biến nhất. Các bước thực hiện phương pháp này bao gồm:
Tương tự như phương pháp sử dụng đầu lệch, phương pháp này cũng sử dụng cách chọn và xử lý vector plasmid như trên. Sau đó là bước lựa chọn và tiến hành xử lý đoạn cài. Các linker là những đoạn ADN có kích thước từ 10 đến 15 nucleotide được tổng hợp từ các phương pháp hóa học. Điểm đặc biệt là giữa các đoạn linker này phải có trình tự nhận biết được thiết lập bởi một enzyme cắt hạn chế loại II. Các cDNA được tổng hợp từ mRNA sẽ được enzyme sao chép ngược lại theo cơ chế nuclease S1. Sau đó, phân tử lai sẽ được tạo nên từ việc ủ các đoạn nối linker có chứa chuỗi đích cùng với cDNA và enzyme AND ligase. Các ADN sau khi được lai tạo sẽ được cắt bởi EcoRI và nhằm tạo ra phân tử có 2 đầu lệch. Cuối cùng là bước tạo nên vector tái tổ hợp bằng cách ghép đầu phân tử ADN lai vào Plasmid. Nhờ tác dụng của ADN ligase mà ADN tái tổ hợp được hình thành. Đây là phương pháp tạo nên ADN tái tổ hợp trên nguyên tắc dựa vào đặc tính đặc biệt của ETT là có khả năng gắn được cùng một loại nucleotide vào đầu OH của ADN. Để tạo nên ADN bằng phương pháp này cần thực hiện các bước sau đây.
Vậy là Trung Tâm ADN NOVAGEN đã vừa mang đến các thông tin hữu ích để giúp các bạn hiểu rõ hơn ADN tái tổ hợp là gì. Bên cạnh đó là mục đích và những phương pháp phổ biến để tạo nên ADN tái tổ hợp hiện nay. |
